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    PUREfrex 刷新了重组无细胞蛋白质合成

    发布时间: 2021-06-23  点击次数: 1056次

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    PUREfrex 刷新了重组无细胞蛋白质合成。

    COSMO BIO USA网页 :产品刚刚更新。

    关于 PURE frex ®

    它不是裂解物。PURE frex ® 是*的基于大肠杆菌成分的重组蛋白质合成技术。你需要的一切。没有你不知道的。将 PURE frex ®试剂盒视为您的个人台式蛋白质合成机。快速、方便且具有成本效益的应用程序仅受您的想象力限制。在短短几个小时内每毫升产生数百微克。

    PURE frex概述

     

    PUREfrex®是一种超酷、超智能、超有用的体外偶联转录/翻译系统,基于大肠杆菌翻译机制,但与 S30 翻译提取物*不同。PUREfrex® 不是提取物。PUREfrex® 是一种重组系统,包含高度纯化的大肠杆菌核糖体、高度纯化的重组蛋白以及转录、翻译、氨酰化和能量再生所需的其他高度纯化因子。因此,与基于细胞提取物的系统相比,PUREfrex 试剂盒提供了以前难以想象的反应可控性,以及用于纯化合成蛋白质的明确定义的分子组分混合物。

    您可以使用 PURE frex做一些事情。

     

    产生原核蛋白质

    产生真核蛋白质

    产生膜蛋白

    产生细胞毒性蛋白。

    产生二硫键蛋白

    确认开放阅读框

    评估突变对 ORF 的影响

    评估氨基酸取代对蛋白质活性的影响

    生产标记蛋白

    通过非天然氨基酸为蛋白质添加官能团。

    为功能域或表位作图生成截短的蛋白质

    核糖体展示

    翻译机制研究

    合成生物学

    蛋白质折叠研究

    体外区室化

    超高纯度的 PUREfrex 成分可将核酸酶和蛋白酶活性降至很低

    PUREfrex 试剂盒成分经过超高纯化,可去除污染的核酸酶和蛋白酶。严格去除核酸酶和蛋白酶活性以保持 DNA(或 RNA)模板的完整性并保持 PUREfrex 反应蛋白的功能,从而最大限度地获得完整的目标蛋白。此外,使用 PUREfrex 2.0 2.1 试剂盒,RNase ß-半乳糖苷酶的污染大大减少,脂多糖 (LPS) 也减少到每 1 µL 反应混合物约 0.1 EU

     

    PUREfrex 套件经过格式化,易于操作。适合高通量操作的一步协议。

     

    基础 Purefrex 套件仅包含 4 个小瓶。溶液 I 包含所有非蛋白质成分,溶液 II 包含所有蛋白质成分,溶液 III 包含核糖体。第四个小瓶包含用于执行阳性对照反应的即用型 DNA 模板。要使用 Purefrex 生产蛋白质,只需将您的模板与溶液 III III 混合并孵育。

     

    可以通过 PCR 轻松制备合适的模板。主要要求包括 T7 启动子、核糖体结合位点(Shine-Delgarno 序列)和终止密码子。

    有关模板准备的详细信息和提示,请单击此页面导航侧栏中的链接。

     

    PUREfrex 蛋白质组分未标记。

     

    如最初所述,所有 PURE 系统蛋白质组分都带有 HIS 标签,以帮助纯化目标蛋白质。因此,在通过离心或过滤去除核糖体后,通过将反应混合物通过金属离子亲和色谱柱,可以通过负选择从 PURE 反应组分中快速纯化目标蛋白质。在 PUREfrex 系统中,蛋白质组分没有被标记,不会对标记的翻译蛋白组分对蛋白质合成的影响留下任何疑问,并且使用户能够通过模板设计生产带有任何所需标签或根本没有标签的目标蛋白质。 

     

    PURE frex基于 PURE 技术。

    PUREfrex Gene Frontier 2011 年推出,作为东京大学 Takuy​​a Ueda 教授开发的开创性 PURE 系统技术(使用重组元件的蛋白质)的商业改编(参考文献 12)。PURE 技术由转录、翻译、氨酰化和能量再生因子组成。所有蛋白质因子和核糖体都与底物组装在一起,包括缓冲液中的氨基酸、NTP tRNA(见下图)。

     

     

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