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alpco问题与解答
所有孔变为亮蓝色用于比色测定
钢板清洗不足
对于自动清洗机:检查喷嘴是否堵塞,验证分配量,并定期清洁以防止和清除任何堆积物。有关更多维护信息,请参阅用户手册。
对于手动冲洗:确保所有井都用冲洗缓冲液强制过满。避免使用多通道移液管进行清洗。考虑从清洗瓶切换到手持式歧管或自动洗板机,特别是在进行化学发光分析时。这里提供了显示正确洗涤技术的视频。
不要跳过清洗或浸泡步骤。如果不在SA-HRP和底物步骤之间清洗,将导致所有井显示非常高的信号。
酶缀合物污染底物
确保所有容器清洁且标记清晰。检查TMB是否为蓝色。如果TMB变为蓝色,请不要在化验中使用,并联系产品支持人员。使用前不要将基材暴露在阳光下。使用新的试剂容器添加每个组分。
高背景(空白或0标准值过高)
钢板清洗不足
对于自动清洗机:检查喷嘴是否堵塞,验证分配量,并定期清洁以防止和清除任何堆积物。有关更多维护信息,请参阅用户手册。
对于手动冲洗:确保所有井都用冲洗缓冲液强制过满。避免使用多通道移液管进行清洗。考虑从清洗瓶切换到手持式歧管或自动洗板机,特别是在进行化学发光分析时。这里提供了显示正确洗涤技术的视频。
不要跳过清洗或浸泡步骤。
旧的或受污染的洗涤缓冲液
清洗缓冲液存放时间过长或留在自动清洗管中会导致污染。根据需要准备新鲜的洗涤缓冲液,并定期清洁自动洗涤设备。
酶缀合物污染底物
确保所有容器清洁且标记清晰。检查TMB是否为蓝色。如果TMB变为蓝色,请不要在化验中使用,并联系产品支持人员。使用前不要将基材暴露在阳光下。使用新的试剂容器添加每个组分。
错误的共轭稀释
高于正常浓度可能导致背景升高。检查残余体积并确认缀合物制备正确。
读板器中使用了错误的过滤器
确认在读取铭牌时使用了协议中指示的正确过滤器。包括使用说明中所示的建议减去空白或OD读数。
标准品和样品无显色或OD读数非常低
读板器中使用了错误的过滤器
确认在读取铭牌时使用了协议中指示的正确过滤器。
试剂配制错误
确保所有容器都有清晰的标记,并将适当的浓缩液和稀释剂添加到正确的小瓶中,以使每个“工作"成分用于分析。
试剂混合不充分
使用前,让重组试剂放置在手册中所示的时间长度内。使用适当的设备(涡流混合器等)确保试剂在使用前是均匀的。
板材晃动不足
不正确的摇动运动会导致混合不足和抗体/分析物相互作用。按照使用说明中建议的速度摇动板。建议使用半径很小的轨道运动振动器。参见示例。
试剂中的混合
如果一次运行多个分析,请将试剂分开以避免混淆。在向分析板添加试剂之前,仔细检查试剂标签。
试剂被污染或添加顺序错误
验证所有化验成分的外观、储存条件和有效期。按照协议中的步骤进行操作。确保按正确顺序添加每个组件。
使用了备用部件批次或过期部件
某些组件具有高度的批次特异性。务必与制造商核实是否使用了备用部件批次。不要使用过期的试剂。
未正确遵循分析培养时间
遵循方案中所示的培养时间和温度。降低任一因素都会影响测定动力学,并可能导致低信号。如果方案列出了TMB培养的时间范围,则确保在建议的最长时间内培养试验。
延迟读取板材
如果进行化学发光ELISA,则应在短时间内读取平板。有关套件特定时间,请参阅协议。延迟读取印版会导致信号降低。
仅样品无显色或OD读数非常低
实验设计中的错误
调查样品来源。如果可能,使用替代方法测试样品,以确认样品在工作测定范围内对感兴趣的生物标志物应为阳性。当刺激生物标志物生产时,可能需要调整实验设计。
样品处理不正确
确保样品未在室温或冷藏条件下长时间暴露。验证样品未经历重复的冻融循环。如果可能,在≤-70°C的温度下等分并储存样品。
样本稀释计算错误
验证样品稀释度是否正确。如有必要且在试剂盒规格范围内,以较高浓度(较低稀释度)重新测试样品。
未验证的样本类型
未经验证的样品类型可能与试剂盒的测定缓冲液或测定范围不兼容。
板材晃动不足
不正确的摇动运动会导致混合不足和抗体/分析物相互作用。按照使用说明中建议的速度摇动板。建议使用半径很小的轨道运动振动器。参见示例。
控制超出范围
试剂处理不正确
确保试剂已正确储存和处理,且在有效期内。注意,一些试剂在重构后的保质期有限。
标准曲线差
验证是否使用了适当的标准曲线,并对照先前分析的值和分析证书中给出的值检查结果。有关更多信息,请参阅“较差标准曲线"部分。注:对于化学发光测定,不同的化学发光读数器的RLU可能会有很大差异。
标准品和/或对照品重构错误
有关标准品/校准品和对照品重构的正确体积和缓冲液,请参见方案和批次特定分析证书。使用前,让重组试剂放置在手册中所示的时间长度内。使用适当的设备(涡流混合器等)确保试剂在使用前是均匀的。
使用了错误的曲线拟合
使用方案中建议的曲线拟合。如果提供了多个建议,请使用适合标准数据点的回归方法。强烈建议使用带有4参数和5参数回归选项的软件程序。
样本的意外结果
样品制备不当
按照方案中的方法进行适当的样品制备。确保样品未在室温或冷藏条件下长时间暴露。验证样品未经历重复的冻融循环。如果可能,在≤-70°C的温度下等分并储存样品。
样本ID混淆
检查样本ID,以确认其已正确标记并添加到平板上。
样品稀释误差
如有必要,验证样品稀释度是否正确,外推的样品值是否与正确的稀释系数相乘。
报告单位的差异
验证报告的计量单位与分析的计量单位一致。执行任何必要的换算计算。当比较不同试剂盒中获得的值时,如果有参考标准,确保校正化验校准中的任何差异。
实验设计中的错误
调查样品来源。如果可能,使用替代方法测试样本,以确认预期样本值。当刺激生物标志物生产时,可能需要调整实验设计。
干扰物质
考虑与样本基质(如使用抗凝剂)、临床诊断(如类风湿因子)或治疗相关的潜在干扰物质。
特异性
由于糖基化、蛋白质折叠和抗体特异性的差异,不同系统(大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞系)中表达的天然蛋白质和重组蛋白质的识别可能有所不同。不同供应商的套件可能会有不同的认可度。
含量漂移:从板开始到结束的值差异
因重组或稀释导致的延迟
在开始化验工作流程之前,准备好标准品、对照品和稀释样品。
试剂不在温度下
在开始化验前,确保所有所需试剂处于使用说明书中规定的室温。
向第一口井和最后一口井添加试剂之间的延长时间
如果可能,在稀释板或微量滴定管中制备标准品和对照品,然后使用多通道移液管转移至测定板。使用试剂容器和多通道移液管将常用试剂添加到测定板中。
批间变异性(对照品或在不同平板上测试的样品的精度差)
操作员间可变性
观察试剂制备、移液技术和测定时间的差异。
移液管校准的差异
移液管校准的差异可能会导致可变性,特别是在移液量较小时。
仪器仪表的差异
当在同一天或不同的日子在多个平板上测试样品或对照品时,应在相同的设置下使用相同的平板振动器、平板清洗器和平板读取器。
环境条件的变化
注意温度的差异。请记住,一般室温、靠近窗户(尤其是在非常寒冷或非常晴朗的日子)以及靠近可能会散发热量的仪器可能会影响化验温度。
样品处理的差异
额外的冻融循环或在室温或冰箱中增加的时间可能会影响样品结果。
北京华新康信也有Alpco实验试剂销售,有Alpco实验样本;Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio Moltox ForteBio Toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin toxin Alpco实验 Alpco试剂 Alpco说明 Alpco试剂方案Alpco实验说明 Alpco说明书 Alpco技术参数 Alpco方案对比 Alpco介绍 Alpco广州试剂 Alpco深圳试剂Alpco说明书 Alpco技术参数Alpco实验方案Alpco技术对比Alpco购买说明 Alpco江苏试剂 Alpco北京试剂Alpco厦门试剂Alpco大理试剂Alpco武汉试剂Alpco福建试剂Alpco安徽试剂Alpco广西试剂Alpco厦门试剂Alpco常州试剂Alpco安徽试剂Alpco长沙试剂Alpco哈尔滨试剂Alpco沈阳试剂Alpco深圳试剂Alpco武昌试剂Alpco湖北试剂Alpco湖南试剂Alpco上海试剂Alpco ForteBio实验试剂,moltox实验试剂,toxin实验试剂,ForteBio moltox toxin 各种试剂的实验参数,说明书,欢迎咨询 Alpco试剂介绍 Alpco试剂介绍 Alpco研究方案
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