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小白蛋白猫#MCA-3C9的小鼠单克隆抗体
小白蛋白是一种低分子量胞质钙结合蛋白,含有“ EF手钙结合基序,是该亚类(1)中表征的第yi个蛋白质。小白蛋白在快速收缩的肌肉,大脑和某些内分泌组织中表达。在脑中,它尤其集中在分子层的Purkinje细胞和中间神经元中,但在许多皮质GABA能中间神经元中也发现(1-3)。这些GABA能神经元在大多数情况下仅表达三种钙结合蛋白之一,即小白蛋白,钙网蛋白或钙结合蛋白。结果,这些中间神经元可以根据它们在这三种蛋白质中的含量(4-6)进行识别和分类。每种类型的中间神经元都具有不同的电生理特性,因此,可以根据它们在这三种蛋白质中的含量来鉴定和分类不同类型的中间神经元(7)。因此,针对小白蛋白的抗体是有用的细胞类型标记物,与这种抗体一样,它们不会与相关分子钙网蛋白或钙结合蛋白发生交叉反应。EnCor还生产鸡小白蛋白的多克隆抗体CPCA-Pvalb。我们还提供多种针对calbindin(MCA-9和CPCA-Calb)和calretinin(MCA-3G9,MCA-6A9和CPCA-Calret)的小鼠和鸡抗体,可以对适当的细胞和组织样品进行两次和三次标记。鼠标左移选择图像以获得更大的视野。
大鼠小脑切片的免疫荧光分析,用小鼠mAb染色小白蛋白,MCA-3C9,稀释度为1:1,000,绿色,并与鸡pAb染色钙结合蛋白,CPCA-Calb,稀释度为1:2,000,红色。蓝色是核DNA的DAPI染色。用4%多聚甲醛对大鼠进行心脏心脏灌注后,将大脑固定24小时,切成45μM,并用上述抗体将自由漂浮的切片染色。大多数浦肯野细胞强烈表达小白蛋白和钙结合蛋白,因此呈黄色,而篮,星状和高尔基细胞仅表达小白蛋白,因此呈绿色。
使用小鼠mAb对小白蛋白,MCA-3C9,以1:1,000的绿色稀释度对骨骼肌溶解产物和His标记的重组蛋白进行Western印迹分析:[1]蛋白标准品(红色),[2]小鼠肌肉,[3]全长人小白蛋白,[4]全长人降钙素和[5]全长人降钙素。正如预期的那样,在肌肉裂解液中检测到一条12kDa的条带,在His标记的重组小白蛋白蛋白泳道中检测到一条18kDa的条带,因为His-tag和其他载体衍生的序列使该分子增加了约6kDa。请注意,尽管MCA-3C9抗体具有相关的氨基酸序列,但它们与calbindin或calretinin均不交叉反应。
名称: 小鼠单克隆抗体小白蛋白
免疫原 在大肠杆菌中表达并纯化的全长重组人蛋白质。
HGNC名称: PVALB
分子量: 12kDa的
主办: 鼠
同型: IgG1
物种交叉反应: 人,大鼠,小鼠,牛,猪,马
RRID: AB_2572372
格式: 在50%PBS,50%甘油和5mM NaN 3中的 1mg / mL纯化抗体
应用范围: WB,IF / ICC,IHC
推荐的稀释液: WB:1:1,000-1:5,000 ICC / IF或IHC:1:1,000-1:5,000
存储: 在4°C稳定一年,可在-20°C长期保存
小鼠单克隆抗体髓鞘碱性蛋白
Cat#MCA-7G7
髓磷脂碱性蛋白(MBP)是神经系统中轴突周围髓鞘的主要蛋白之一。由于分子量相对较低且丰度较高,因此30年前从纯化的蛋白质中确定了蛋白质序列(1)。该蛋白质由中枢和神经系统中的少突胶质细胞产生,因此针对MBP的抗体是该细胞类型的良好标记。在外周神经系统中,MBP是由有髓的雪旺氏细胞表达的,因此该抗体可用于识别培养物或切片材料中的这些细胞。在中枢神经系统中,通过从单个基因交替转录产生的四种不同形式的蛋白质,蛋白质产物在人体内的分子量分别为21.5、20.5、18.5和17.2kDa。啮齿动物的单个基因也产生4种不同的蛋白质,但是剪接机理不同,产生4种形式,大小略有不同,分别为21.5、18.5、17和14kDa。一些兴趣集中在MBP作为多发性硬化症小鼠模型(MS,3)和人类患者(4)中潜在的重要自身抗原上。检测释放到血液和脑脊液中的MBP有可能作为MS脱髓鞘和轴突丢失以及其他相关损害和疾病状态的替代生物标志物(例如5)。
MCA-7G7抗体是针对从牛脑中进行生物化学纯化的MBP制剂制备的。它可用于鉴定神经细胞培养物中的少突胶质细胞和雪旺氏细胞,可视化切片材料中的髓鞘和髓鞘细胞,并检测MBP基因产物的蛋白质印迹。该抗体对醛固定也相当不敏感,因此可用于石蜡切片的免疫组织化学。MCA-7G7抗体结合所有四个CNS MBP亚型,因此该抗体的表位位于所有四个基因产物共有的“核心”中。进一步作图将表位定位于肽TPPPSQGKG,即人21.5kDa序列的氨基酸125-133。用重叠的肽产生了数据,这表明后四个氨基酸SQGKG可能是表位的关键元素。该肽在大鼠,小鼠,牛和许多其他物种中是不变的,因此该抗体将具有广泛的适用性。相反,我们的替代小鼠单克隆MCA-7D2仅与21.5kDa和18.5kDa大鼠MBP同种型结合,但与所有牛和人同种型结合,将表位映射AEGQRPGFGYGGRASDYKSAHKGFKGVDAQGTLSKIFKLG,即人21.5kDa序列的氨基酸145-184。可以从此处下载人和大鼠中四种CNS MBP同种型的序列比对。鼠标左移选择图像以查看大图,而“其他信息”选项卡上则选择更多信息。
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