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产品时间：2020-04-14
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产品货号 | 产品名称 | 品牌 |
11363735001 | Hybridoma Fusion and Cloning Supplement | life-ilab |
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11363735001 罗氏
杂交瘤融合和克隆补充
分析证书（COA） 公告（PDF）
货号与规格 库存 包装规格 安全性
价格（CNY） 数量
11363735001
需要从国外调货，预计到货时间2020年7月6日- 详情 10毫升
安全数据表
相关类别 杂交瘤媒体补充剂， 杂交平台， ITS等补品， 无血清培养基， 细胞培养，
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形成 解
打包 pkg 10毫升（50x）
制造商 没有。 罗氏
运入 干冰
储存温度 −20°摄氏度
产品描述
一般说明
培养基补充剂，由白蛋白，胰岛素，转铁蛋白，细胞因子，胆固醇源，其他定义的有机和无机化合物以及胎牛血清组成（终浓度：0.5％）。
HFCS包含人类蛋白质。已对从中分离出人类蛋白质的原料进行了乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和HIV-1 / 2抗体测试，发现呈阴性（根据当前的质量控制程序）。
应用
杂交瘤融合和克隆补充剂（HFCS）被用作正常培养基的补充剂，以支持融合后和克隆过程中B细胞杂交瘤的生长。HFCS替代饲养细胞。解冻储存在液氮中的细胞后，它还可用于优化杂交瘤细胞的生长。[1] [2]
物理形态
溶液（50x浓缩，pH 7.4）；通过孔径为0.2μm的膜过滤
准备说明
工作浓度： HFCS（50x）用基础培养基稀释为1:50（v / v）。强烈建议您使用RPMI1640。终培养基也应包含L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。
分析笔记
生物活性：测定了杂交瘤细胞系的高克隆效率。
其他注意事项
仅用于生命科学研究。不可用于诊断。
Hybridoma fusion and cloning supplement （HFCs）（50×） 媒体补编 Solution（50×concentrated）
Cat. No. 011 363 735 001 y Version 18
Content version: March 2016 10 ml
产品描述 综述杂交瘤融合和克隆补充（HFCS）是一种 低血清含培养基补充 胎牛血清（FCS）的替代 杂交瘤细胞。 HFCS是专门为优化细胞生长而设计的 低血清细胞培养中新融合杂交瘤的筛选和克隆 媒体。 HFCS的特殊组成进一步避免了 使用饲养细胞的必要性。 成分培养基补充剂，包括白蛋白、胰岛素， 转铁蛋白，细胞因子，胆固醇来源，其他 界定的有机和无机化合物与胎儿 小牛血清（终浓度：0.5%）。 HFCS含有人类蛋白质。原料来自 人类的蛋白质被分离出来 乙肝表面抗原检测 （HBsAg）以及HIV-1和HIV-2抗体和 发现是阴性的。 生物学的 活动 每一批都要进行高克隆效率的检测 杂交瘤细胞（见图1）。 配方•溶液（50×浓度，pH7.4）； •通过0.2 m孔径膜过滤； •内毒素（LAL）：10 EU/ml，检测支原体 工作 浓度 HFCS浓缩液（50×）用1:50（v/v）稀释 基本培养基。强烈建议使用RPMI 1640年。终培养基还应含有L-谷氨酰胺和
-巯基乙醇。 应用HFCS是一种血清替代物，含有FCS和 血清白蛋白、胰岛素、转铁蛋白、细胞因子、胆固醇源和其他特异性 有机和无机化合物。 HFCS避免了血清在细胞培养中的额外使用 新融合杂交瘤生长培养基 源自SP 2/0，P3X63Ag8.653。 HFCS的特殊组成进一步避免了 饲养细胞的使用。新融合的生长速度 HFCS辅助培养基中的杂交瘤细胞是 比人内皮细胞要高得多 培养上清液（HECS）-或补充的FCS 中等。杂交瘤HFCS克隆方法的研究 补充培养基比补充培养基更有效率（图1）。 工具包存储/ 稳定性 未开封溶液在1525°C下稳定，直到 标签上的有效期。 注：建议配制适当的等份，避免反复冻融
程序和所需材料 推荐 媒体 配方 请在下表中找到推荐的 小鼠源性培养基配方 杂交瘤。 1每种培养基配方可能含有进一步的补充剂，例如抗生素、L-谷氨酰胺- 巯基乙醇丙酮酸钠，非必需 氨基酸。 2含氨基蝶呤的帽子中氨基蝶呤的浓度 介质可以通过使用 分离浓缩试剂[补充羟色胺培养基；氨基蝶呤（250×）]。这样就可以稀释氨基蝶呤。 3.杂交瘤从含血清培养基转移到无血清培养基 NUTRIDOMA-SP（需要断奶）（见 备注4）。 4建议将NUTRIDOMA-SP用于SP 2/0 衍生性杂交瘤。 阶跃介质配方 高血清1低血清1游离血清1 融合•任何基底 中等（例如。， RPMI 1640） •未来作战系统（用于 再悬浮 之后的细胞 融合） 任何基础培养基（如RPMI 1640） 冷冻•含FCS •10%二甲基亚砜（v/v） 选择2•任何基础 中等（例如。， RPMI 1640） •10%未来作战系统（v/v） •10%BM 条件H1 （伏/伏） •HAT介质补充，1× •任何基底 中等（例如。， RPMI 1640） •1×HFCS •HAT介质补充，1× •任何基底 中等（例如。， RPMI 1640） •1个NUTRIDOMA-CS •HAT介质补充，1× 筛选•参见选择 克隆•任何基础 中等（例如。， RPMI 1640） •10%未来作战系统（v/v） •10%BM 条件H1 （伏/伏） •任何基底 中等（例如。， RPMI 1640） •1×HFCS •任何基底 中等（例如。， RPMI 1640） •1个NUTRIDOMA-CS 杂交瘤 文化 •任何基底 中等（例如。， RPMI 1640） •10%未来作战系统3（v/v） •RPMI 1640型/ DMEM（1:1） •0.5–1%FCS3 （伏/伏） •营养学 •RPMI 1640型/ DMEM（1:1）4 •NUTRIDOMASP 1%
选择成功后介绍 阳性组织培养上清液已通过第yi次筛选，下一步是克隆 产生抗体的细胞。单细胞克隆确保 产生感兴趣抗体的细胞 单克隆抗体的分泌 保持稳定。 单细胞克隆有几种方法，例如。， 通过限制稀释，在软琼脂中生长，流式细胞术。 限制稀释法克隆单细胞 如下所示。 尽管如此，每一次尝试都是为了确保 在电镀之前，电池处于单电池悬浮状态 不能保证殖民地不会出现 从两个粘在一起的牢房里。因此，限制性稀释克隆少应该做两次 （“再克隆”）产生克隆种群。 处理 说明 •如果许多杂交瘤必须同时克隆 时间，可能值得用 使用10毫升或更大的吸管。一滴就够了 吸管将输送大约100微升。 •克隆将在4天后开始出现，并且应该 准备在第7-10天开始放映。 •可以从包含多个 克隆体以及仅包含单个 克隆人。 程序请参考下表。 注：杂交瘤应健康迅速 在克隆时生长的。
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