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lifesensors
产品时间：2020-04-14
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产品货号 | 产品名称 | 品牌 |
UM-0604-0050 | Anti - K63 TUBEs, K63 TUBEs, Flag | lifesensors |
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UM604：K63管（标志）
SKU：UM-0604-0050
类别：抗K63管，K63管
标签：绑定实体，特定于链接，下拉
技术指标 附加信息 评论（0） 应用领域 文件资料
技术指标
FLAG®K63 TUBE是从细胞和组织提取物或体外合成混合物中有效分离和富集K63多泛素化蛋白的理想试剂。FLAG®K63 TUBE由多个泛素相互作用基序（UIM）组成，这些基序由刚性的螺旋接头连接，这些接头将UIM隔开以选择性地结合扩展的K63连接的多泛素链。结果是显示出与K63连接的多泛素具有高亲和力结合的肽，并且相对于K48-和K11-连接具有100010,000倍的选择性。该肽在体内的表达抑制了K63连接的多聚泛素依赖性过程，并保护K63连接的多聚泛素链免于降解。将该肽与FLAG表位标签结合起来，产生了适合分离的强力亲和试剂，K63连接的多聚泛素修饰的蛋白的纯化和表征。标记K63-TUBE允许分离K63连接的多聚泛素，而无需过度表达泛素突变体，标记的泛素或包含DUB抑制剂，而这些都可以改变细胞生理学。分离的泛素化蛋白可以通过蛋白质印迹，质谱或进一步的生化分析来表征。（FLAG是Sigma-Aldrich Corporation LLC的注册商标）。
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信息
标签
旗
分子量
9 kDa
物理状态
液体
数量
50微克
浓度
变量
存储
-80°C，避免冻融
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应用领域：
从细胞和组织提取物中分离和富集K63多泛素化蛋白
泛素化蛋白的分离，用于蛋白质组学研究
好处
K63链的纳摩尔离解常数（Kd）
K63链比K48链或K11链优100010,000倍
不需要将抗原决定簇标记的泛素过表达用于下拉
与FLAG兼容® 技术，提供了灵活性和特异性
背景
泛素和多泛素化 泛素（Ub）对蛋白质的翻译后修饰对其区域化有着深远的影响， 退化和功能（1）。单泛素与靶蛋白的结合称为单泛素化， 附加的Ub部分可与该初始Ub共轭，形成聚合物链。存在功能性多ub链的证据 通过Ub中的七个赖氨酸残基中的任何一个，甚在Ub的N-末端形成。多泛素化是可逆的，与 复合“连接酶”催化链的连接，以及 二氢奎宁酶（DUBs）。两种具特征的多泛素化形式通过赖氨酸48（K48）或 63（K63）。K48连锁多泛素化普遍的结果是蛋白酶体介导的降解，而 在其他细胞过程中，K63连接的多泛素化修饰参与了DNA的调节 损伤反应（2），内质体分类（3，4），错误折叠/聚集蛋白的自噬（5，6）和神经退行性变（7）。 传统的泛素化蛋白的鉴定方法通常需要抗原表位标记的Ub的免疫沉淀 通过蛋白质的过度表达。基于它们对泛素的天然亲和力，特定的泛素结合相关结构域 （UBAs）已经成为从细胞环境中分离和检测多泛素链的有用试剂。这些 然而，蛋白质对泛素的亲和力相对较低。由于这些原因，决定了 蛋白质很难被证明。 试管：多泛素分离与表征的一次革命 由CIC bioGUNE的Manuel Rodriquez博士开发的串联泛素结合实体（管）的使用克服了这些问题 问题，并正在成为泛素研究*的策略（8，9）。第yi代的管子 K48-和K63连接的具有一个数字纳米摩尔Kd的四ub链，比单体Ubs紧密约100到1000倍。 试管也能保护蛋白质免受dub和蛋白酶体的侵害，即使没有通常需要的抑制剂来阻止这种情况的发生 活动。这可以有效地从细胞系、组织和器官中分离天然多聚体链和附着蛋白 比上述条件更不可能改变细胞生理的条件。TUBE1和TUBE2近 证明可在不加区别的情况下丰富所有多亚基链连接类型，使这些试剂适用，即使 相关蛋白的连锁类型未知（8）。
下一代管子：聚支链的连锁特异性隔离 近，西姆斯等人。（10） 已经证明串联泛素相互作用基序（UIMs）可以被设计成显示出显著的 对聚ub链结合专一性的偏好。这些结构与低纳米摩尔Kd结合K63 Ub链，但结合不良 K48和K11链条。K63 polyUb的1000到10000倍偏好是UIM和长度以及 串联uim之间连接器的螺旋性质。这个链接器赋予uim刚性和空间，以便与 每一个Ub分子，增强对延伸K63链的识别。此外，这些串联uim的表达似乎 选择性地抑制K63依赖的细胞过程，并保护聚ub链不被原位降解。这些K63管子 作为研究细胞过程特别依赖于K63的工具，生命传感器得到了进一步的发展 多泛素化。Flag K63-TUBE 1允许从细胞和组织中捕获和分离由这种连锁类型修饰的蛋白质 提取物或体外混合物
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