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产品货号 | 产品名称 | 品牌 | |
G9211 | Anti-HaloTag® Monoclonal Antibody | Promega | |
E1500 | Luciferase Assay System | promega | |
E2691 | FuGENE? 6 Transfection Reagent | promega | |
G7572 | CellTiter-Glo? Luminescent Cell Viability Assay | promega | |
E6120 | ONE-Glo? Luciferase Assay System | Promega | |
E4550 | Luciferase 1000 Assay System | Promega | |
G7572 | CellTiter-Glo? Luminescent Cell Viability Assay | promega | |
A3500 | Reverse Transcription System | promega | |
U1515 | dNTP Mix | promega | |
G8091 | Caspase-Glo® 3/7 Assay | Promega | |
E2620 | Bright-Glo™ 萤光素酶检测系统 | promega | |
M1801S | T4 DNA Ligase | promega | |
G7892 | CytoTox-ONE™ Homogeneous Membrane Integrity Assay | promega | |
V5113 | Sequencing Grade Modified Trypsin | promega | |
G9243 | CellTiter-Glo® 2.0 Assay | promega | |
G9242 | CellTiter-Glo® 2.0 Assay | promega | |
Z5342 | MagneSphere® Technology Magnetic Separation Stands | promega | |
G3581 | CellTiter 96® AQueous One Solution Cell Proliferation Assay (MTS) | promega | |
G7572 | CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay | promega | |
v1062 | Chymotrypsin, Sequencing Grade | promega | |
v1 651 | Glu-C, Sequencing Grade | promega | |
G7892 | CytoTox-ONE™ Homogeneous Membrane Integrity Assay | promega | |
P1193 | Nuclease-Free Water | promega | |
V4251 | TBE Buffer, 10X, Molecular Biology Grade | promega | |
V2011 | SoftLink™ Soft 1Release Avidin Resin | promega | |
V5113 | TNM-FH (Liquid) - HyClone Insect Cell Culture Media | promega | |
V5113 | Sequencing Grade Modified Trypsin | promega | |
E6120 | ONE-Glo™ 萤光素酶报告基因检测系统 | promega | |
G9243 | CellTiter-Glo® 2.0 Cell Viability Assay | promega | |
E6120 | ONE-Glo™ 萤光素酶报告基因检测系统 | Promega | |
E2691 | FuGENE 6 转染试剂 | promeg | |
E2940 | Dual-Glo® 双萤光素酶报告基因检测系统 | promega | |
P1171 | DTT, Molecular Grade (DL-Dithiothreitol) | promega | |
G7892 | CytoTox-ONE™ Homogeneous Membrane Integrity Assay | promega | |
E4651 | pGL4 52[luc2P STAT5RE Hygro] Vector | promega | |
G7572 | CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay | promega | |
V4251 | TBE Buffer, 10X, Molecular Biology Grade | promega | |
V5113 | Sequencing Grade Modified Trypsin | promega | |
E2520 | Steady-Glo® 萤光素酶检测系统 | promega | |
E2661 | Glo Lysis Buffer, 1X | promega | |
P1171 | DTT, Molecular Grade (DL-Dithiothreitol) | promega | |
E4982 | ViaFect™ Transfection Reagent | promega | |
V5113 | Sequencing Grade Modified Trypsin | promega | |
E4530 | Luciferase Assay System | promega | |
E6120 | ONE-Glo™ 萤光素酶报告基因检测系统 | Promega | |
V5113 | Sequencing Grade Modified Trypsin, Frozen | promega | |
E2620 | Bright-Glo™ 萤光素酶检测系统 | promega | |
E1500 | Luciferase Assay System | promega | |
E6120 | ONE-Glo? Luciferase Assay System | promega | |
G7892 |
| promega | |
E2940 | Dual-Glo® 双萤光素酶报告基因检测系统 | promega | |
G7572 | CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay | promega | |
G7572 | CellTiter-Glo® Luminescent Cell Viability Assay | promega | |
E6120 | ONE-Glo™ 萤光素酶报告基因检测系统 | promega | |
E6120 | ONE-Glo™ 萤光素酶报告基因检测系统 | promega | |
G1780 | CytoTox 96® Non-Radioactive Cytotoxicity Assay | promega |
产品种类齐全,北京华新康信与国外诸多生命科学领域*合作众多,代理品牌Glycan Therapeutics,Intact Genomics,Integral Molecular,Medkoo,Niomech,Terragene,Anshlabs wako,EZbioscience,CMCTAG,Anatrance ,Favorage ,Affinity,Advanced biomatrix,bioplastics,天地人和,TRC,凯杰,义翘,sciencell;价格优势品牌:seracare,Streck,Toxin,Zeptometrix,sigma,ForteBio,CanSyn,polyplus,santa,chormsystems,bethyl ,moltox, permagenlabware ,bioflux,Bio-Rad, coriell, listlabs, ZYMO , ABclonal , EY laboratories ,greatcellsolar , agdia , beckman , Bioxcell,,biomax ,usascientific , TRC ,nist ,americanelements,cayman , Fisher ,thermofisher , nanopore, 日立, 三菱株式会社 ,RD, takara等,紧跟生命科学的发展,不断满足客户的需求,为各位的科研之路上添砖加瓦!
抗HaloTag®单克隆抗体 Anti-HaloTag® Monoclonal Antibody
G9211_Anti-HaloTag--单克隆抗体_3
针对HaloTag®蛋白的单克隆抗体
与其他非HaloTag®蛋白几乎没有交叉反应
可以通过Western blot检测低0.5–1ng的HaloTag®融合蛋白
以1mg / ml的浓度提供
尺寸:200mg
Anti-HaloTag®单克隆抗体是针对HaloTag®蛋白的小鼠单克隆抗体,可用于通过Western blot检测HaloTag®融合蛋白。 HaloTag®平台满足了细胞成像,蛋白质纯化和蛋白质下拉应用中功能蛋白质分析的灵活性需求。了解有关HaloTag®技术的更多信息。
应用:完整的HaloTag®融合蛋白的免疫学检测,专门用于蛋白质印迹。蛋白质印迹的建议工作稀释度为PBS中的1:1,000。
通讯协定
完整协议
HaloTag®技术:专注于成像技术手册
1.HaloTag®技术和细胞成像简介了解蛋白质的功能作用以及它们如何在细胞内相互作用越来越重要。通常需要多次重组蛋白融合才能完成这项研究,由于在不同应用之间移动效率低下,有时可能很慢且麻烦。结果,需要提供在表达和定位,蛋白质纯化,蛋白质相互作用发现,筛选和进一步的功能分析之间具有灵活性的重组蛋白质标签。 HaloTag®平台(a–g)满足了功能蛋白分析灵活性的需求。这种模块化技术基于融合标签和合成配体之间共价键的形成,旨在全面表征细胞和生化环境中蛋白质的功能。有多种HaloTag®配体(a–g)和试剂盒可用于荧光细胞成像和蛋白质捕获/纯化,以及可定制的反应性配体构建基块(a,e,f)。 HaloTag®报告基因蛋白是水解酶的一种工程化,无催化活性的衍生物,可与HaloTag®配体形成共价键(图1)。在生理条件下,该共价键快速形成且高度特异性且基本上不可逆,从而形成即使在严格条件下也稳定的复合物(1-3)。 HaloTag®蛋白是33kDa的单体蛋白,不是哺乳动物,植物或大肠杆菌细胞内源的;因此,没有非特异性活性水平,只有高标记特异性。该技术已成功用于许多系统,包括:哺乳动物细胞(4),细菌(5),酵母(6),植物(7)和动物模型(8)。
使用HaloTag®荧光配体进行细胞成像的优势在于可以地进行标记的时空控制:HaloTag®技术的模块化性质以及与配体的快速结合动力学,可以对蛋白质运输和周转进行直接成像。由于可用的配体既具有变化的荧光光谱,也具有细胞渗透和不渗透的特性,因此用户可以对标记进行空间和时间控制。例如,研究人员只能用不渗透细胞的配体标记膜结合蛋白的表面池,并跟踪其生物学,内在化或其他命运。或者可以先用一种“颜色”的配体标记蛋白质,然后在一段时间后再次用含有不同颜色的染料的配体标记蛋白质。这种脉冲追踪标记允许直接观察蛋白质随时间的运输和/或更新。
图1.HaloTag®融合蛋白显示了与TEV位点成比例的连接子以及与HaloTag®配体共价相互作用的结合袋。标记活细胞,然后对活细胞或固定细胞进行成像,和/或直接运行凝胶进行定量:所有HaloTag®荧光配体均允许对活细胞进行标记和成像。根据您的工作流程需要,可以通过一个清洗步骤(一个小时内)快速完成标签,或者使用无洗程序进行一整夜的标签。由于HaloTag®融合蛋白和配体之间共价键的稳定性以及染料本身的稳定性,也可以对通过标准免疫细胞化学方案操作的固定细胞进行成像。这种稳定性还允许使用荧光扫描仪通过SDS-PAGE直接分析标记的细胞。仅设计一个可用于多种应用程序的基因构建体:无需设计和克隆新的表达构建体即可获得新功能。除细胞成像外,相同的融合蛋白还可以纯化为单个纯蛋白,或者与它的搭档一起下拉以发现新的蛋白相互作用。使用HaloLink™树脂从HaloTag®荧光配体转换为HaloTag®纯化和下拉系统,可有效捕获和回收HaloTag®融合蛋白或复合物。
用户要提供的材料(解决方案组合物请参见第9.B节。)•装有表达HaloTag®融合蛋白的细胞的密闭玻璃盖罩•37°C时适合细胞使用的完整培养基•培养基中缺少酚红37°C(可选)•1X PBS(pH 7.5,可用于洗涤)•共聚焦显微镜或宽视野荧光显微镜,配有合适的滤光片组和/或激光器(请参见第9.A节和图2)•37°C + CO2细胞培养培养箱1.在即将加入细胞之前,在温暖的培养基中制备HaloTag®配体的1:200稀释液。这是5倍的工作液解决方案。 2.用5XHaloTag®配体工作储备溶液替换现有体积的五分之一,标记细胞,并轻轻混合。因此建议的终标记浓度建议为5µM TMR。 3.5µM AlexaFluor®660; 1µM diAcFAM,OregonGreen®或AlexaFluor®488;和10µM香豆素配体。 3.在37°C + CO2细胞培养箱中孵育15分钟。 4.对于可透过细胞的配体,请用等体积(或更大体积)的温暖新鲜培养基(或1X PBS [pH 7.5])轻轻替换含配体的培养基。重复两次,以温暖的*培养基结束,共进行三遍*漂洗,然后继续执行步骤5。对于细胞不渗透的配体(含AlexaFluor®的配体),请用相等(或更大)的浓度替换含配体的培养基体积的温热新鲜培养基两次,然后进行步骤7。因为它们不渗透细胞,所以这些配体不需要洗去未结合的配体。 5.在细胞培养箱中于37°C + CO2的*培养基中培养细胞30分钟,以洗涤未结合的配体。 6.用等体积的新鲜温热培养基替换培养基。使用缺少酚红的培养基可以改善成像效果。 7.转移显微镜,并捕获图像。
5月-7月疫情期间,北京华新康信生物科技有限公司进行产品大力让利活动,代理Promega品牌。北京华新康信生物科技有限公司是 Promega品牌代理商。北京华新康信专业代理各大产品,系列齐全,大部分现货,保证质量,真诚合作,欢迎您咨询,我们将竭尽全力满足您的需求。选购Promega代理,您选北京华新康信生物科技有限公司,北京华新康信生物科技有限公司专业代理Promega品牌,Promega代理 北京华新康信生物科技有限公司是(Promega)(Promega代理)(Promega专业代理)(Promega北京代理)(Promega上海代理)(Promega代理),欢迎电话咨询,我们的产品,将会给您带来意想不到的成效,欢迎电话咨询,合作共赢。