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产量最高的新生儿心肌细胞分离
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科学家的正确策略
大多数关于新生大鼠或小鼠肌细胞分离的方法不仅是耗时耗力的过程,而且会产生研究人员最关心的低细胞活力。
需要更多细胞来研究细胞生长、分化和死亡的细胞和分子机制的科学家会发现,他们的实验不可能获得低产量的细胞。
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新生大鼠或小鼠心肌细胞分离系统无风险,保证满意。
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Neomyt 试剂盒 nc-6031 6 次 415 美元
SureCoat(用于培养板涂层) SC-9035 500 毫升
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NS培养基(含血清) m-8031 500 毫升
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NW 培养基(不含血清)
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* 1 rxn 可以做 5 - 35 颗新生大鼠心脏,20 - 80 颗小鼠心脏
* Neomyt 试剂盒中不包含 NS 培养基和 NW 培养基
非病毒哺乳动物表达系统
转基因表达系统
非病毒转基因
表达系统
诱导表达
向量系统
miRNA表达载体
基于 miRNA 的
基因敲除
小环 miRNA
表达载体
通过订购我们的产品,您已阅读并同意我们的 条款和条件
miRNA 表达载体
Cellutron 为您提供强大的 miRNA 工具来检查 miRNA 对细胞功能和表型的影响。有数百种库存载体可用于您选择的天然 miRNA 和 antagomiR 过表达。此外,Cellutron 还构建了用于表达人工 miRNA 的表达载体,这些人工 miRNA 被设计成与您的目标基因具有 100% 的同源性,从而阻断基因表达。
Cellutron miRNA expression vectos 允许您:
1. 表达人工 miRNA 以敲低靶基因的表达。
2. 高效转染多种细胞类型,包括:分裂细胞、非分裂细胞、成体和胚胎干细胞以及iPS细胞。
3. 在体内和体外有条件地表达您选择的 miRNA。
4. 生成用于长期 miRNA 表达的稳定细胞系。
一般 miRNA 通路
MicroRNAs (miRNAs) 是长度为 21 到 25 个核苷酸的小型非编码 RNA,它们通过与 3' 非翻译区以及可能与靶 mRNA 的编码序列进行碱基配对来调节基因表达,从而导致翻译抑制或降解。
miRNA 由 RNA 聚合酶 II 转录,可以来源于单个 miRNA 基因、蛋白质编码基因的内含子或通常编码多个密切相关的 miRNA 的多顺反子转录物。Pri-miRNAs 通常有几千个碱基长,在细胞核中被 RNase Drosha 加工成 70-100 个核苷酸长的发夹状前体,称为 pre-miRNAs。在转运到细胞质后,pre-miRNA 被 RNA 核酸内切酶 Dicer 进一步加工以产生双链 miRNA。
然后将此 miRNA 双链体整合到称为 RNA 诱导的沉默复合物 (RISC) 的多组分蛋白质复合物中。在此过程中,miRNA双链体的一条链被选择为成熟的miRNA,而另一条链通常被快速去除和降解。miRNA 5' 末端的核苷酸 2-8 被命名为“种子序列",因为该区域似乎对 mRNA 靶标识别特别重要。
miRNA在真核生物中非常保守,在基因表达和调控中发挥着至关重要的作用。
诱导表达载体系统
Cellutron 利用 Cre-Loxp 技术开发了一种新型可诱导表达系统,并提供了调节转基因表达的能力。该系统包含两个具有强 CAG 启动子的表达载体,用于高效基因表达。pEGFP/RFP-miRNA-BL 和 pEGFP/RFP-T2A-GOI-BL 是具有 EGFP 和 3X 终止序列的表达载体,其两侧有两个 loxP 位点,然后是用于表达 RFP 和 miRNA 或蛋白质编码转基因的共顺反子序列. 此外,在 miRNA 和蛋白质编码转基因的表达盒下游克隆了一个杀稻瘟素 (BL) 表达盒(用于哺乳动物细胞中的药物选择)。与诱导型表达载体共转染需要 pCreER-IRES-Puro。
共转染后,系统最初只表达 EGFP,这是一种方便监测转染效率的报告蛋白。可以在体外和体内添加 4-OHT 以激活 Cre 重组酶的条件活性形式,从而导致 miRNA 或蛋白质编码转基因的高水平和受调控的表达。
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