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改良Ames试验
工作原理:在开发该试验时,对标准的Ames致突变性试验进行了修改,以对主要导致石油的致突变性和致癌性的一类化合物,多环芳香化合物(PAC)提供大的敏感性。使用改良的致突变性试验对小鼠皮肤绘画生物测定中已评估的一系列油进行了测试,并通过剂量反应的回归分析对其致突变性反应进行了量化。然后将这些分析得出的斜率(称为致突变指数或MI)与根据皮肤绘画生物测定中的肿瘤反应计算的类似致癌性指数(CI)相关联。由此导出的标准曲线用于建立MI阈值,在该阈值之上,预计油将在皮肤喷漆试验中显示出统计上显著的致癌活性。由于MI和CI之间的相关性成立,因为油的致突变性和致癌性在很大程度上(如果不是的话)由PAC介导,因此改良Ames试验的适用性仅限于含有这些化合物的试验材料。这一类别包括炼油厂物流,以及使用过的或再精炼过的油、煤焦油和油,以及构成部分此类材料的配方产品,前提是配方中不存在干扰测试性能或解释的成分。
终点:改良Ames试验的终点是致突变性指数或MI。它是使用线性回归分析确定的致突变性剂量反应曲线的斜率。对于高度精炼的油,MI可以从零到某些催化裂化原料的大于1200。
MI的解释:在小鼠皮肤绘画生物测定中,MI与皮肤致癌潜力的相关性表明,大多数MI大于1.0的油是致癌的,而大多数MI小于1.0的油不是致癌的。后一种规范的例外是一类被称为亮浆提取物或残留芳香提取物的油,要在欧盟认证为非致癌物质,其MI必须小于0.40。
后勤:我们希望提交用于改良Ames测试的样本不大于25 ml。确定MI的小样本量为0.2 ml,但如果将已知体积的油预先计量到适合使用相对于样本量五倍体积的DMSO进行提取的容器中,则可从0.05 ml的样本中获得有限的数据。化验周转时间取决于工作量,但当赞助商要求快速获得结果时,我们通常可以提供每周7天的测试和报告服务,不收取额外费用。测试完成后,以MI的形式将结果通过电子邮件提供给主办方。详细的书面报告(也通过电子邮件发送)通常在一两个月内完成,但也可以根据需要快速提供。报告的纸质副本可应要求提供。我们欢迎有关定制报告格式或数据分析的咨询,并很乐意提供关于修改的Ames测试或其他测试的使用和解释的教程,作为我们咨询服务的一部分。
工作成果:PetroLabs严格按照ASTM方法E 1687 10进行改良Ames试验。根据该方案,我们在每次测定中测试参考油(阳性对照)的全剂量范围,以确保所用S-9制剂的代谢性能在可接受的历史范围内。我们自豪地为赞助商提供了明确的MI数据。如果给定试验的任何控制参数超出范围或致突变性的剂量-反应曲线不能很好地拟合(例如,活性材料的R^2<0.90),我们将重复试验,无需额外费用。我们按照严格的科学标准和实验室实践进行改良Ames试验,但我们不遵守良好实验室实践(GLP)指南的所有文件和质量保证规定。因此,目前,我们的研究仅用于赞助商信息,如果相关机构要求全遵守GLP,则不适用于监管提交。
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